gM純化不再難，超大孔介質來幫忙

有著先鋒免疫作用的IgM抗體，廣泛應用于疾病感染的預防、早期診斷及治療。然而，獲得高純度的IgM抗體是我們必須要解決的首要問題。具有大孔優勢的層析介質對于純化有著“巨球蛋白”稱號的IgM，是個值得嘗試的選擇。

 巨球蛋白IgM的獨到之處

免疫球蛋白根據其重鏈的抗原性不同，分為五類：IgG、IgM、IgA、IgD和IgE。其中IgM是迄今為止，實際發現的在人體循環系統中最大的抗體，通常以五聚體或六聚體的形式存在，分子量分別約為900 kDa或1050 kDa，其優點如下：

》由于IgM抗體存在于血液和淋巴液中，通常是感染后首先出現的第一抗體，IgM抗體生成后可以起到先鋒免疫作用，同時可以激活補體和提高自身免疫調理，對于清除體內的病毒和微生物也有一定作用。

》相比IgG的2個臂，IgM有10個臂可與靶抗原結合，具有更高的親和力。

》相關資料顯示，在診斷自身免疫疾病和某些癌癥方面，IgM可能比IgG更有效，國外已有公司專門致力于將IgG轉化為IgM結構以提高親和力以創造出雙特性抗體的研究。

IgM純化有難度

IgM抗體在純化方面較成熟的IgG抗體有一定的難度。

對于抗體純化，親和層析是最好的純化方法，但是，人IgM可以采用具有廣譜Ig結合能力的Protein L，而其他種屬來源的IgM，與Protein L沒有結合位點，商品化少且成本高。

目前市場上已有的純化方法包括酸銨沉淀、凝膠過濾、親和層析、離子交換等，這些方法大都采用普通的層析介質，或多或少都會有一些局限性。由于IgM分子量巨大，普通的瓊脂糖微球和聚合物微球孔徑較小，抗體不能進入微球孔道內部導致結合載量極其低，同時狹窄的孔徑會導致抗體以擴散的方式通過，穿質速率慢，處理量低，分離時間長，不易維持IgM的穩定性，而且普通的瓊脂糖微球和聚合物微球耐壓性有限，不利于裝出高柱效。

由此可見，在純化IgM的工藝上需要有更全面的考量。

IgM純化不再難

能夠解決難點、痛點的產品，才是市場最大的需求。科諾賽聚焦當前IgM純化的難點痛點，不斷地探索，結合自有的超大孔技術，獨辟蹊徑，推出了高效的IgM純化解決方案。

方案一、親和法

第①步 親和層析純化：

使用Protein L Sup-porousd超大孔親和層析介質，捕獲IgM。

第②步 離子交換層析純化：

使用MoSphere? 50V Q超大孔陰離子交換層析介質，吸附IgM，去除痕量雜質。

方案二、排阻法

第①步 復合模式層析純化：

使用AdMix Chromrose? FF（陰離子交換與疏水雙重功能）復合模式層析介質，吸附宿主細胞雜質，IgM分子量大，排阻在外直接流穿。

第②步 離子交換層析純化：

使用MoSphere? 50V Q超大孔陰離子交換層析介質，吸附IgM。

當然，IgM抗體純化的方案不只以上這兩種，下游純化是一個錯綜復雜的過程，因地制宜的根據發酵液情況調整純化方案是最明智的選擇。親和法和排阻法適用于重組表達的IgM抗體，對于腹水和血清抗體，由于其抗體亞型較多，則需要針對性地設計純化方案。相對于進口的標準化產品，科諾賽更傾向于靈活的根據市場需求，定制客戶需要的產品和方案。

不同應用場景的多孔徑設計

層析介質的配基與目標物的作用基本發生在層析介質顆粒內部，精確的孔徑設計對純化至關重要。科諾賽根據客戶不同的應用場景，開發出不同粒徑、孔徑大小的大孔聚合物離子交換層析介質，滿足用戶的應用需求。

科諾賽大孔離子交換層析介質的優勢：

》蛋白活性高：

超大孔徑的設計可明顯減弱蛋白質的去折疊程度，提高了蛋白活性；

》非特異性吸附低：

微球表面進行親水化改性后鍵合離子交換基團，非特異性吸附低，機械化程度高；

》高流速、高載量：

超大孔徑通透性更好，分子傳質速度快，可在高流速狀態下保持更高的載量，載量提高10倍以上；

》高穩定、高回收率：

超大孔徑顯著提高生物分子在層析介質上吸附的熱穩定性，具有更高的收率。

后發先至，國內唯一

進口品牌壟斷層析填料市場幾十年，是疫情給了國產品牌一個機會。科諾賽在疫情最肆虐的時候誕生，團隊成員沒有“海歸博士”，沒有“美國綠卡”，也沒有“歐美永久居留權”，是地道的“土鱉”團隊。這個“土鱉”團隊基于對產業的熱情、對市場的深度理解，從“做別人有的產品”開始，深度發掘市場需求，根據市場需求逐漸“做別人沒有的產品”。

質粒、AAV病毒載體、LV病毒載體、溶瘤病毒、流感病毒、IgM抗體、IgA抗體、mRNA疫苗、多糖結合疫苗等生物分子由于其體量巨大至今沒有很好的純化方案。科諾賽團隊針對這個市場痛點，開發出了新型的超大孔層析介質。

超大孔制球技術早有科學家建立了理論基礎，但是因為“孔大易碎球”的原因一直沒有商業化生產。

科諾賽生物自成立以來，一直秉持“以客戶為中心，以市場為導向”的研發服務方針，針對客戶在純化階段的難點痛點，不斷地尋找最佳的解決方案，通過近三年來的不懈努力，刻苦攻關，千錘百煉，不斷打磨，終于突破技術瓶頸獲得成功，是目前國內唯一掌握超大孔制球技術并實踐成功的企業。

下一步，科諾賽將利用超大孔技術繼續研發超大孔親和產品，mRNA親和、質粒親和、AAV親和、外泌體親和，不斷補足國內層析的短板，做市場需要的產品，更好地滿足國內生物藥企的純化需求。