一文讀懂 His標簽蛋白純化

His標簽蛋白，大家應該都很熟悉了，它是比較常見的蛋白表達方式，可以用金屬螯合層析（即IMAC）法來進行分離純化，它具有的優點是表達方便而且基本不影響蛋白的活性。

了解一下IMAC

金屬螯合層析（即IMAC）是一種新型的應用于原核蛋白純化的技術，此方法是通過蛋白質表面一些特殊的氨基酸，與金屬離子發生相互作用，從而對蛋白質進行親和純化。金屬螯合層析法可用于多組氨酸親和標簽蛋白的快速純化，在一個純化步驟中可實現 100 倍的富集，甚至可以以高產率獲得高達 95% 的親和標簽蛋白純度。

His標簽的過人之處

• His標簽（His-Tag）由6-10個組氨酸殘基組成，分子量小，不到0.84KD，通常插入在目的蛋白的C末端或N末端，不影響目標蛋白的結構和功能且能在變性條件下進行純化，加之其價格便宜，是目前蛋白分離純化中最受歡迎且最有效的的選擇之一。

  
  

• His標簽（His-Tag）可與多種金屬離子發生特殊的相互作用，如Ca2+、Mg2+、Ni2+、Cu2+，Fe3+等，其原理是利用蛋白質表面的特性，使之被吸附在凝膠柱上，從而達到分離純化蛋白的目的。

  
  

• His標簽（His-Tag）蛋白純化完之后可以不需切除此標簽， 且純化的條件溫和，不會對蛋白產生功能影響。

His標簽蛋白純化填料的選擇

Ni-NTA/IDA ChromroseTM 6FF是科諾賽生物研發生產的Ni親和填料，以高流速瓊脂糖為基質，以次氮基三乙酸（NTA）或亞氨基二乙酸（IDA）為配基，并螯合金屬離子Ni2+而形成的一種親和層析介質，廣泛用于His標簽蛋白等生物分子的分離純化。

Ni-NTA/IDA ChromroseTM 6FF主要特點：

• 吸附容量大、選擇性好、分辨率高；

• 超低限度的Ni2+泄露, 易于再生、成本低；

• 穩定性、生物/溶劑相容性優異，有利于保持產品的生物活性和提高產品收率及擴大層析操作條件的選擇范圍。

科諾賽生物為您提供的服務：

（1）按客戶需求提供各種用于分離純化的層析介質及層析預裝柱

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