外泌體工業級分離純化解決方案
外泌體的研究及應用，一直保持著較高的話題度和關注度。
外泌體的特殊結構及大量的活性生物分子成分，決定了其多元化的臨床價值。近年來，國內的科研人員對外泌體在醫療領域和醫美領域的研究也呈現爆炸性增長。
盡管外泌體的市場關注度很高，但實際商業化應用卻很少。從目前的市場來看，主要是由于外泌體大規模生產的純化技術有局限，產量較低，一直制約著臨床轉化的應用。
由于外泌體的分子量較大，因此要獲取高質量、高純度、且高產量的外泌體，超大孔填料似乎是更有效的選擇。
● 外泌體小百科
外泌體（Exosome，EXO）是內涵體的來源，是由多泡體（MVBs）與質膜融合以后釋放到細胞外基質中的膜性囊泡狀小體，直徑介于30~150nm之間。所有類型的細胞，在正常及病理狀態下均可以分泌外泌體。而且外泌體天然存在于血液、唾液、尿液、乳汁等體液中。
外泌體內部含有多種復雜的生物大分子，包括蛋白質、核酸和磷脂等，而且具有豐富的生物學功能，可以將脂類、碳水化合物、蛋白質、信使RNA（mRNA）、微小RNA（miRNA）和DNA等生物分子從一個細胞傳遞到另一個細胞，從而交換遺傳信息、重編程宿主細胞，進行細胞間通訊等。
● 外泌體的應用
醫療領域的信使
外泌體的臨床應用正得到廣泛關注。在體外診斷應用中，有研究表明外泌體能夠作為腫瘤診斷和分類的可靠性標志物，可為不同類型的腫瘤早期檢測提供新視角。在免疫學研究中，免疫細胞來源的外泌體中含有抗原肽——MHC復合物和各種抗原，能夠顯著抑制腫瘤生長。而促進免疫抑制性的外泌體，可有效抑制炎性因子，具有超強的抗炎能力。在藥物遞送載體研究中，由于外泌體具有高度的穩定性和生物相容性以及低免疫原性，可以滲透生物屏障，可有效地幫助藥物在體內快速地傳輸和釋放，從而提高藥物的治療效果和減少副作用。
醫美領域的新寵
外泌體進入醫美領域后，立即吸引了眾多眼球。動物和人源干細胞外泌體，已經被證明能夠通過激活多種信號通路，從而具有促進組織再生、抗衰老、抗炎抗敏和免疫調節等多種功能，已經在功能性護膚和抗衰、再生修復等輕醫美項目中廣泛應用，并取得了良好效果。而且，外泌體還開始應用于毛發管理領域，改善脫發和促進頭發生長。
● 外泌體的純化
在實際的應用中，混合了所有成分的外泌體是不被接受的，獲得高純度的外泌體對后續的研究應用至關重要。例如，尋找針對某種腫瘤的無癥狀形式有特異性的外泌體；早期卵巢癌或胃腸道癌癥，需要純度更高的外泌體群體。
常用的純化方法有局限
目前，外泌體領域已經從純粹的科學研究轉向了產業化，在工業化放大生產中如何實現外泌體的大規模分離純化，是急需解決的問題。
市場對于外泌體常見的純化方法主要有：超速離心法（UC），多聚物沉淀法（PP），免疫磁珠法，分子排阻法（SEC），切向流過濾（TFF），而這些方法都存在一定的局限性，要么是純度低，要么是產量低，或者是操作工藝復雜，成本高等，且大都是科研級別的。
● 外泌體的純化工藝方案
科諾賽擁抱市場需求，針對外泌體純化的現實問題，結合自有的超大孔色譜技術，開發出了適合外泌體分離純化的解決方案。由于外泌體的分子量較大（30~150nm），傳統的填料沒辦法純化這個大小級別的物質，超大孔填料是必然的選擇。MoSphere? 70X DEAE/Q是科諾賽自主研發的微米級孔徑的層析介質，對于外泌體的純化，有非常好的效果。
方案一 排阻層析法（適用于工業級別）推薦此方法
第①步 復合模式層析純化：
使用Crysto shell 400（陰離子交換與疏水雙重功能）復合模式層析介質，吸附宿主細胞雜質，外泌體分子量大，被排阻在外直接流穿。
PS：Crysto shell 400相比Capto Core 400孔徑更小，可確保回收率。
第②步 離子交換層析純化：
使用MoSphere? 70X DEAE / Q超大孔陰離子交換層析介質，進行外泌體的精純。
PS：MoSphere? 70X DEAE / Q具有微米級孔徑，載量更高，傳質速度更快。
方案二 疏水層析法（適用于工業級別）
第①步 疏水層析純化：
使用Butyl Chromrose? 4FF疏水層析介質，去除宿主細胞等雜質。
第②步 離子交換層析純化：
使用MoSphere? 70X DEAE/Q超大孔陰離子交換層析介質，捕獲外泌體。
PS：MoSphere? 70X DEAE / Q具有微米級孔徑，載量更高，傳質速度更快。
配方案流程圖
方案三 分子尺寸排阻法（適用于科研級別）
凝膠過濾層析純化：
使用Chromrose? CL4B凝膠過濾層析介質，根據不同粒徑大小的顆粒流經層析柱的時間不同的原理，從不同樣本中分離出外泌體。
外泌體的純化方案也不止以上這三種，也可以根據實際需求使用各種方法結合的方式，下游純化是一個錯綜復雜的過程，因地制宜的根據實際情況調整工藝方案是最明智的選擇。
踏實做事走得更遠
隨著外泌體研究的逐漸明朗，商業化放大需求越發強烈。科諾賽的超大孔色譜分離技術及產品，可以有效滿足工業化生產中外泌體的大規模分離純化需求。
科諾賽在下游純化領域取得的成績，市場有目共睹。隨著一個又一個應用案例的成功，純化工藝也會越來越成熟，產品也會越來越精良。
看起來，踏實做事的科諾賽，正在走向更遠的地方。
