His標簽-重組蛋白純化的首選
蛋白純化標簽的發現是重組蛋白純化技術的一個突破，蛋白質純化標簽來源多樣，市場上已有多種用途廣泛的蛋白融合標簽，有的標簽能促進靶蛋白溶解性增強，有的標簽能從粗提的生物提取物中高效檢測和純化重組蛋白。其中His標簽是目前重組蛋白純化中使用最廣泛的親和純化標簽。
His標簽-重組蛋白純化的首選
His標簽通常是由6~10個組氨酸殘基構成，其本身的特性對目的蛋白沒有影響，不會形成二聚體，分子量較小，只有0.84kDa，對重組蛋白的下游應用基本沒有影響，一般情況下不需要切除；而且具有結合量高、成本低、高通用性、純化條件溫和、結合特異性高、多種上樣條件可供選擇等優勢，在變性和非變性條件下均不影響重組蛋白的親和純化，是重組蛋白分離純化的第一選擇。
His標簽蛋白純化解決方案
在標簽蛋白純化過程中，合適的標簽不但有利于蛋白的純化，促進蛋白的可溶性，同時也不影響蛋白的結構功能和下游應用。His標簽組氨酸上的N原子能夠與某些過渡金屬離子形成配位鍵，利用這一特性，可以使用含有金屬離子配基的層析填料來捕獲和純化His標簽重組蛋白。
目前，市場上的His標簽純化填料產品有很多，從填料的質量、性能、供應鏈等方面綜合考量，Ni Chromrose鎳離子層析填料系列性價比較高，有1mL至10L多種包裝規格，可滿足用戶從條件篩選、實驗室研究到商業化生產的多樣化需求。
不同配體的Ni填料性能對比
1）Ni-IDA Chromrose 6FF / HC
Ni-IDA Chromrose 6FF / HC是由高度交聯瓊脂糖為基質，偶聯IDA為配體，螯合鎳離子（Ni2+）制備而成的層析介質，可以耐受最高0.3MPa的壓力，更穩定，可在相對較高的流速下，實現對目的蛋白的純化。如果純化的首選的是高產量而非純度，此款產品是正確的選擇。
2）Ni-NTA Chromrose 6FF / HC
Ni-NTA Chromrose 6FF / HC由高度交聯瓊脂糖為基質，偶聯NTA為配體，螯合鎳離子（Ni2+）制備而成的層析介質，可以耐受一定濃度的還原劑、變性劑或耦合劑等苛刻條件，配體更穩定，耐受性強，鎳離子不易脫落，適合對蛋白純度要求較高的純化。
3）Ni-TED Chromrose 6FF
Ni-TED Chromrose 6FF 可耐受100mM EDTA和10mM DTT, 在含有EDTA及DTT的情況下直接進行目的蛋白純化，更適合捕獲和純化分泌到真核表達培養基上清中的His標簽蛋白，此介質的清洗再生工作簡單，無需脫鎳直接進行 NaOH 清洗，實驗效率高。
應用案例
》Ni-TED Chromrose 6FF純化實驗：
層析介質： Ni-TED Chromrose 6FF
樣 品： 青霉素酶發酵液
實驗設備： 1 mL Xtrap Ni-TED FF 鎳凝膠柱、蛋白純化儀
平衡緩沖液：0.2M NaCl，50mM Tris-HCl，0.1mM EDTA，PH7.4
淋洗緩沖液：0.2M NaCl，50mM Tris-HCl，0.1mM EDTA，30mM 咪唑，PH7.4
洗脫緩沖液：0.2M NaCl，50mM Tris-HCl，0.1mM EDTA，500mM咪唑，PH7.4
》Ni-TED Chromrose 6FF測試：
1 是國外知名品牌His純化瓊脂糖填料
2、3、4是國內某品牌His純化瓊脂糖填料
5 是 Ni-TED Chromrose 6FF
6~12 是國內品牌His純化磁珠產品
圖8數據表明，Ni-TED Chromrose 6FF在載量、純化效果方面表現較為優秀。
綜合來看，Chromrose 鎳離子填料在純化His標簽蛋白的應用中效果很好，純度與收率均有保證，可在His標簽純化中作為首選層析填料。
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